De nucleïnezuurdetectiekit voor meerdere ademhalingspathogenen is een kwalitatieve in vitro-test van 29 veel voorkomende ademhalingspathogenen in monsters van de bovenste en onderste luchtwegen.
De gedetecteerde pathogenen worden weergegeven in de volgende tabel 1 :
[Tabel 1]
Virus | Covid-2019
|
Bacteriën | Klebsiella pneumoniae |
Schimmel | Aspergillus |
| Griep A, griep B | Mycoplasma pneumoniae | Cryptokokken |
| Syncytiaal virus | Chlamydia pneumoniae | Pneumospora |
| Adenovirus | Streptococcus pneumoniae |
|
| Enterovirus | Legionella pneumophila |
|
Menselijk metapneumovirus | Bordetella pertussis |
|
| Menselijk boca-virus | Haemophilus influenzae |
|
| Rhinovirus | Chlamydia psittaci |
|
| Para-influenzavirus type 1, 2, 3, 4 | Groep A-streptokokken |
|
| Corona-virus 229E |
|
|
| Corona-virusOC43 |
|
|
| Corona-virus NL63 |
|
|
Corona-virus HKU1 |
|
|
-
De gevriesdroogde PCR-kit kan worden gebruikt voor het detecteren van
29 veel voorkomende ziekteverwekkers in de luchtwegen, waaronder
17 virussen,
9 bacteriën en
3 schimmels.
Er zijn specifieke primers en probes ontworpen voor veel voorkomende ademhalingspathogenen. Omgekeerde transcriptie-polymerasekettingreactie (RT-qPCR) en fluorescerende probetechnologie werden gebruikt om de amplificatie en detectie van specifieke nucleïnezuursequenties van pathogenen in [Tabel 1] te bereiken, en het RNaseP-gen/UDG-enzym/dUTP-systeem werd toegevoegd om vals-negatieve en vals-positieve resultaten te voorkomen.
Deze kit is een volledig voorgemengd gevriesdroogd systeem. Taq-enzym, UDG-enzym, reverse transcriptase, reactiebuffer, specifieke primers en probes die nodig zijn voor amplificatie worden allemaal gelyofiliseerd in PCR-buizen. In totaal zijn 1-8 Wells gelyofiliseerde poeders voor verschillende doelgenen. Detectie kan direct worden uitgevoerd na het toevoegen van de oplossende oplossing en het geëxtraheerde nucleïnezuur.
| Componenten | 8 monsters/kit
| 24 monsters/kit | Ingrediënt |
| RP06 Gevriesdroogd reagens | 8×8 stripbuizen | 24×8 stripbuizen | Specifieke primer≺obes voor de detectie van pathogenen en DR-genen in [Tabel 1], dNTP/dUTP Mix, Mg2+, Taq-polymerase, reverse transcriptase en UDG |
| RP06 Positieve controle | 200 μl×1 buis | 400 μl×1 buis | Plasmide dat elke doelgensequentie bevat |
| Negatieve kwaliteitscontrole | 200 μl×1 buis | 400 μl×1 buis | Plasmide dat de menselijke RNaseP-gensequentie bevat |
| Rehydratatie oplossing | 1 ml×1 buis
| 1 ml×3 buisjes | Stabilisator |
Opmerking:
Componenten van verschillende batches kunnen niet worden gemengd.
Monsternucleïnezuurextractie moet tegelijkertijd worden uitgevoerd met producten voor negatieve kwaliteitscontrole en producten voor positieve kwaliteitscontrole.
Gevriesdroogde reagentia zijn verzegelde verpakkingen. Gebruik ze onmiddellijk na opening en stel ze niet langdurig aan de lucht bloot. Het gevriesdroogde reagens is ingekapseld in 0,2 ml PCR-achtbuis. Als het gebruikte fluorescerende PCR-instrument het verbruiksartikel niet kan gebruiken, moet de vloeistof van elk gat worden geïmporteerd en aangebracht voordat de verbruiksartikelen van de machine worden geladen.
De kit kan bij kamertemperatuur worden vervoerd (niet langer dan 1 maand).
Herhaaldelijk invriezen en ontdooien mag niet meer dan 7 keer plaatsvinden.
1). Multiplex testen
Er kunnen aangepaste selecties worden gemaakt op basis van de ziekteverwekkers die klanten moeten detecteren, en er kunnen testresultaten voor een verscheidenheid aan ziekteverwekkers worden verkregen.
2). Stabiel en betrouwbaar
Deze kit is een gevriesdroogd PCR-systeem. De actieve stoffen die nodig zijn voor het detectieproces (enzymen, dNTP's, primerprobes, enz.) zijn vooraf in het systeem geplaatst. Het ondersteunt transport op kamertemperatuur binnen 1 maand en heeft een goede opslagstabiliteit, waardoor betrouwbare en nauwkeurige testresultaten worden gegarandeerd.
3). Snel en handig
Het hele testproces met dit reagens kan binnen 90 minuten worden voltooid. Bij gebruik met PCR-apparatuur kan de testtijd worden verkort tot 50 minuten. Bovendien zijn voor dit systeem geen vloeistofvoorbereidings- en verpakkingshandelingen nodig, waardoor tijd en arbeidskosten worden bespaard.
4). Gevoelig en nauwkeurig
De analytische gevoeligheid van deze kit is 1000 kopieën/ml. Het omvat menselijke interne standaardmonitoring, het hele proces van bemonstering, nucleïnezuurextractie tot nucleïnezuurdetectie, om valse negatieven te voorkomen. Het detectiesysteem omvat altijd het UDG/dUTP-systeem, dat vals-negatieve resultaten veroorzaakt door besmetting van amplificatieproducten effectief kan voorkomen.
Prestatie-index
1. De analytische gevoeligheid van deze kit was 1000 kopieën/ml.
2. Precisie: de variatiecoëfficiënt (CV, %) van de precisie-Ct-waarde binnen/tussen batches is minder dan 5%.
3, nauwkeurigheid: het negatieve/positieve referentieconformiteitspercentage van de testonderneming is 100%.
Uitrusting en materialen vereist
1. Poedervrije wegwerphandschoenen en andere persoonlijke beschermingsmiddelen;
2. Wegwerpbare verbruiksartikelen voor monstername en opslagbuizen;
3. Pipetten (verstelbaar) en steriele pipetpunten;
4. Nucleïnezuurextractie/zuiveringsreagens en bijpassende nucleïnezuurextractor;
5. RNase-vrije centrifugebuisjes en rekken van 1,5 ml;
6. Tafelcentrifuge voor centrifugebuizen en PCR-buizen;
7. PCR-instrument in real time met FAM/VIC/ROX/CY5-fluorescentiekanalen ( ABI7500, Bio-rad CFX96, QuantStudio, SLAN-96S, BTK-96 ).
HPV-genotyperingskit
UTI & DR-paneel
Soa-screeningskit
