Inleiding tot PCR -machines

PCR -machine, ook bekend als PCR -genamplificatieinstrument, PCR -amplificatieinstrument, polymerasekettingreactie nucleïnezuuramplificatieinstrument, is een instrument dat specifiek DNA versterkt met behulp van PCR -technologie (polymerasekettingreactie). PCR -machine wordt op grote schaal gebruikt in medische en biologische laboratoria, zoals voor het bepalen of een testlichaam PCR -machines zal vertonen, worden op grote schaal gebruikt in medische en biologische laboratoria, bijvoorbeeld om te bepalen of een testorganisme een genetisch ziekteprofiel vertoont, om infectieziekten te diagnosticeren, om genen te repliceren, genen te repliceren en ouders te identificeren. Wat is een PCR -machine?

Hier is de inhoudslijst:

l De basisstructuur van een PCR -machine

l Working Principle van PCR -machine

l Reactiekinetiek van de PCR -machines

De basisstructuur van een PCR -machine

Een PCR -machine bestaat meestal uit een hot cover -onderdeel, een thermisch cyclusgedeelte, een transmissiedeel, een besturingsgedeelte en een voedingsonderdeel, enz.

Werkprincipe van PCR -machine

Het werkingsprincipe van de PCR -machine is vergelijkbaar met het natuurlijke replicatieproces van DNA, waarvan de specificiteit afhankelijk is van oligonucleotide-primers die complementair zijn aan beide uiteinden van de doelsequentie en bestaat uit drie basisreactiestappen: denaturatie-analextensie.

1. Denaturatie van sjabloon DNA

Het sjabloon-DNA wordt gedurende een bepaalde tijd tot ongeveer 93 ° C verwarmd om het dubbelstrengige sjabloon-DNA of het dubbelstrengige DNA gevormd door een PCR-machine te dissociëren om het enkelstrengs te maken zodat het aan de primers kan binden in voorbereiding op de volgende reactieronde.

2. Gloeien (denaturatie) van sjabloon -DNA en primers

Nadat het sjabloon-DNA wordt gedenatureerd in enkelstrengs door verwarming, wordt de temperatuur verlaagd tot ongeveer 55 ° C en zijn de primers gekoppeld en gebonden aan de enkelstrengige complementaire sequentie van het sjabloon-DNA.

3. Uitbreiding van primers

Het DNA-sjabloonprimer-conjugaat wordt gesynthetiseerd onder de werking van taqDNA-polymerase, met behulp van DNTP als het reactiemateriaal en de doelsequentie als de sjabloon, om een nieuwe semi-geconserveerde gerepliceerde streng complementair aan het sjabloon-DNA-streng te synthetiseren volgens het principe van base-pairing en semi-geconserveerde replicatie.

Door het proces van denaturatie-analextensie te herhalen, kunnen meer "semi-geconserveerde replicaatketens " worden verkregen en kunnen deze nieuwe ketens worden gebruikt als sjablonen voor de volgende cyclus.

De PCR-machine duurt 2 ~ 4 minuten om elke cyclus te voltooien, en dus herhaaldelijk kan het DNA dat in elke cyclus wordt geproduceerd de sjabloon voor de volgende cyclus worden, en elke cyclus versterkt het kopie-nummer van DNA-specifiek gebied tussen twee synthetische primers tussen 1-voudig en het PCR-machineproduct kan snel in de exponentiële vorm van 2. Na 25 ~ 30 cyclen (2 ~ 3 uur), het pcr-machine. 109-voudig na 25 ~ 30 rondes (2 ~ 3 uur), en in de praktijk kan het in het algemeen 106 ~ 107-voudig bereiken.

Reactiekinetiek van de PCR -machine

De drie reactiestappen van de PCR -machine worden herhaald, wat resulteert in een exponentiële toename van de hoeveelheid DNA -versterking. De uiteindelijke DNA -amplificatie van de reactie kan worden berekend met behulp van y = (1+x) n. Y vertegenwoordigt het aantal kopieën van het geamplificeerde DNA -fragment, X vertegenwoordigt de gemiddelde versterkingsefficiëntie per amplificatie en N vertegenwoordigt het aantal cycli. De theoretische waarde van de gemiddelde amplificatie -efficiëntie is 100%, maar in de vroege fase van de werkelijke reactie is de toename van het doelsequentie -DNA -fragment exponentieel, en met de geleidelijke accumulatie van PCR -machineproducten, verhoogt het versterkte DNA -fragment niet langer exponentieel, maar voert de lineaire groeiperiode in, d.w. De gemiddelde efficiëntie van de PCR -machine bereikt de theoretische waarde niet.

Bioteke Corporation, die zich richt op moleculaire diagnostiek en snelle detectie, met name op nucleïnezuurextractie, is een professionele hightech-fabrikant en PCR-machines. Het speelt zich af in de provincie Wuxi City, de provincie Jiangsu, China. Dus we kijken ernaar uit om met u samen te werken.