Informatie over de voorbereiding van colloïdale gouden oplossingen voor de antigeentest

De bereiding van een colloïdale gouden oplossing voor de Antigeentest Neemt de trisodiumcitraatreductiemethode aan om een colloïdale goudoplossing te bereiden. Neem 1000 ml ultrazuinig water en verwarm het om te koken op een magnetische roerder, voeg 40 ml 1% chloroaurinezuuroplossing toe, wanneer de oplossing opnieuw kookt, voeg snel 36 ml van 1% trisodiumcitraatoplossing toe, ga door met kook wanneer de kleur van de oplossing purple 5min rendt, de beurt en herstel naar het oorspronkelijke volume met ultrapure water na afkoeling. De gemiddelde diameter en zetapotentiaal van colloïdale gouden deeltjes werden gemeten met een nanodeeltjesgrootte analyzer en bewaard bij kamertemperatuur in het donker. Dus wat is de informatie over het bereiden van colloïdale gouden oplossingen voor de antigeen -test? Laten we eens kijken.

Hier is de inhoudslijst:

l Bereiding van colloïdaal goud met het label conjugaten

l Bereiding van snelle antigeen -teststrips

L Minimale detectielimiet

L stabiliteitstest

Bereiding van colloïdaal goud met het label conjugaten

Neem respectievelijk 100 ml antigeen-test colloidalgoud in twee schone beekers, volgens de geoptimaliseerde gemarkeerde pH-omstandigheden, voeg 3,3 ml en 2,1 ml 0,1 mol/L kaliumcarbonaat toe om de pH aan te passen, roer met een magnetische roerder bij 300 r/min gedurende 10 minuten; 2 ml van 10% BSA -oplossing werd toegevoegd en 2 ml van 10% BSA -oplossing werd toegevoegd en het roeren werd 20 minuten voortgezet; Na het roeren werd de antigeen -test colloïdale goudoplossing overgebracht naar twee centrifugebuizen van 50 ml, set de centrifuge -parameters waren 9000 r/min, 20 minuten en 4 ° C en centrifugatie werd uitgevoerd. Haal na centrifugatie de centrifugebuis zorgvuldig weg, schud niet, verwijder het supernatant met een pipet, verzamel het neerslag, reconsteer het met conjugaatverdunnend tot 10 ml en bewaar bij 4 ° C in het donker. De gemiddelde diameter en zeta -potentiaal van de antigeen -test colloïdale goudconjugaatdeeltjes werden gemeten door een analyzer van de nanodeeltjesgrootte.

Bereiding van snelle antigeen -teststrips

Het monsterkussen was uniform gecoat met de behandelingsoplossing van de monsterkussen en de coatinghoeveelheid van elke glasvezel was 30 ml en gedroogd bij 50 ° C gedurende 24 uur. Verdunnen Snelle antigeen -test Colloïdaal goud-gelabelde muis anti-N eiwit monoklonaal antilichaam en colloïdaal goud gelabeld DNP-BSA-eiwitconjugaat met conjugaatverdunnend, de volumeratio is respectievelijk 18% en 20%, en behandeld met het verdunde colloïdaal Gold-conjugaat Het coupler-kussen was uniform gecoat met vloeistof, de coate-hoeveelheid glazen vezel was 30 ml, en het was drieds bij 45 ° CoLD was 30 ml, en het was drieds met 45 ° CoLD was 30 ml, en het was drieds bij 45 ° CoLD was 30 ml, en het was driedig was 30 ml, en het was drieds met 45 ° CoLD was 30 ml, en het was driedig was 30 ml, en het was drieds op 45 ° CoLD was 30 ml. voor 24 uur. Het muis anti-N eiwitmonoklonaal antilichaam en het konijn anti-DNP polyklonale antilichaam werden verdund met PBS die respectievelijk 0,01 mol/L pH7,4 en 5% trehalose bevatten tot de concentratie van 2,0 mg/ml en 1,0 mg/ml,. Als de detectielijn (T -lijn) en de kwaliteitscontrolelijn (Cline), werd het vangstantilichaam gecoat op een nitrocellulosemembraan (NC -membraan) en gedroogd bij 45 ° C gedurende 48 uur. De voorbereide NC-film, conjugaatkussen, monsterkussen en waterabsorberende kussen werden op de bodemplaat op de PVC-bodem op zijn beurt geplakt, in 3 mm/streep gesneden met een slitter, in een kaartkast geplaatst en verpakt in een aluminiumfoliezak. Plaats tijdens de test het nasopharyngeale wattenstaafje in de hefbuis voorgevuld met de extractieoplossing (10 mmol/LPB's, pH7,4, 1%NP-40) en voeg 3 druppels (100 μl) druppelswisseling toe aan het monstergat van de testkaart na extractie gedurende 15s. 15 minuten reactietijd voor visuele interpretatie. Antigeen-test T-lijn en cline zijn beide positief, t-lijn is niet gekleurd, cline is negatief, cline is niet gekleurd, wat aangeeft dat de teststrip effectief is en dat deze opnieuw moet worden getest.

Minimale detectielimiet

Minimale detectielimietstudies werden uitgevoerd met warmte-gedood virusculturen. De eluatie van nasofaryngeale wattenstaafjes van gezonde mensen werd gebruikt als de negatieve matrix voor de antigeen -test. Eerst werd een 10-voudige gradiëntverdunning uitgevoerd. Na het negatieve resultaat van de snelle antigeen-test was de vorige concentratie toen 2-voudige gradiëntverdunning en niet minder dan 19 keer van de 20 tests waren positief. Het concentratieniveau (≥95%) werd gebruikt als de minimale detectielimiet van het reagens.

Stabiliteitstest

Plaats de voorbereide antigeen -test afgewerkte reagenskaart in een oven van 50 ° C en test om de twee weken met hoge en lage concentratiekwaliteitscontrole -stoffen. Herhaal de test 3 keer voor elk monster. Het verschil in de banddiepte tussen het versnelde vernietigingsreagens op hoge temperatuur en het controlereagens gedurende 1 week en 8 weken.

Het bovenstaande is de relevante informatie over de bereiding van de colloïdale goudoplossing voor de antigeen -test. Als u geïnteresseerd bent in de Covid-19 snelle antigeen-test, SARS-COV-2 snelle antigeen-test, u kunt contact met ons opnemen. Onze website is www.bioteke.cn.